一、“魚類主要組織相容性復合體Elisa試劑盒"詳細參數(shù)
【檢測方法】：酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【產品性狀】：96T/48T，盒裝液體(兩種統(tǒng)一規(guī)格)
【貯藏條件】：2-8°C
【產品有效期】：二年，我公司Elisa試劑盒均為批次，可放心購買。
【產品主要成分】：酶標板,試劑,標準品等。
【種屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
【產品單價】（具體折扣），可免費代測，含稅含運費。
【標本】血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等
注：標本必須為液體，不含沉淀。
二、“魚類主要組織相容性復合體Elisa試劑盒"的四大特性
1．特異性強：不與其它細胞因子反應。
2．重復性好：板內、板間變異系數(shù)均小于10%。
3．穩(wěn)定性高：實驗效果很穩(wěn)定。
4．超靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品，稀釋度和樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
三、“試劑盒"具體操作方法
以雙抗體夾心法為例展示：
1、雙抗體夾心法檢測抗原        
操作步驟如下：
1）將特異性抗體與固相載體結合，形成固相抗體。洗滌除去尚未結
合的抗體及一些雜質。
2）加入待測標本，保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合，形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質。
3）加酶標抗體，保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。
4）加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。通過比色，測知標本中抗原的量。在臨床檢驗中，此法適用于檢驗各種蛋白質等大分子抗原，例如 HBeAg、HBsAg、hCG 、AFP等。只要獲得針對受檢抗原的特異性抗體，就可用于包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清，包被和酶標所使用的抗體分別取自不同種屬的動物。如應用單克隆抗體，一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相載體和制備酶結合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應，作一步檢測。
在一步法測定中，當標本中受檢抗原的含量很高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合，而不再形成"夾心復合物"。類同于沉淀反應中抗原過剩的后帶現(xiàn)象，此時反應后顯色的吸光值（位于抗原過剩帶上）與標準曲線（位于抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同，如按常法測讀，所得結果將低于實際的含量，這種現(xiàn)象被為鉤狀效應（hook effect），因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應嚴重時，反應甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質（例如血清中 HBsAg、AFP 和尿液 hCG 等）時，應注意可測范圍的zui高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應。
四、樣本處理五部曲
Elisa試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫試驗中關鍵的一步，稍有不慎將導致實驗滿盤皆輸，如何安全，快捷的處理樣本，樣本處理五部曲助您精彩實驗。
1 均質
組織樣本:肉、肝食品類切細，用絞肉機反復絞碎，混合均勻。
水產樣本：去除樣品的非食用部分，食用部分切細，用均質器均漿；原料表面較臟時,需適當用蒸餾水清洗。
蛋類：鮮蛋去殼，蛋黃和蛋白充分混勻。
水果、蔬菜類：先用水洗去泥沙，然后除去表面的水分，取食用部分。
2 振蕩提取
 將提取溶劑加入到裝有樣品的具塞容器中，振蕩，使提取溶劑與容器內的樣品充分接觸以深入到樣本組織內部，提取待測組分。
2.1振蕩方式：振蕩器上進行上下、往返式振蕩、手搖式上下振蕩。
2.2 在組織樣本中加入有機溶劑之間提取時，應邊加邊振蕩，防止組織凝結成團，不利于提取。
3. 在用有機溶劑提取過程中，如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，解決的方法有：①用細頭輕輕的攪拌，破壞乳化后，再重復離心。②再加入適量的提取劑，重新振蕩。注意離心后要保證樣本的稀釋倍數(shù)不變。
4 濃縮
 由于凈化過程中引入的溶劑，可能會降低待測組分的濃度或者不適宜直接分析，需要去除全部有機溶劑。即試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮氣下吹干，再用復溶液溶解干燥殘留物。
濃縮方式：
 氮氣吹干除雜、壓縮空氣吹干除雜。
注意：
1在吹干樣本之前，用甲醇清洗針頭，防止雜質干擾。
2在吹樣本時，針頭應在液面上空，避免與樣本接觸，防止產生交叉污染。
3樣本吹干后應立即取下，避免吹的時間過長，影響zui終檢測結果。
4不同的藥物，吹干后樣本的保質期不同，提倡待樣本回到室溫后立即復溶。
5 凈化
 經過提取的待測組分中通常含有一些會干擾試劑盒中抗原抗體反應的雜質或者是含有與待測物結構相似的雜質。將待測組分與雜質分離的過程，我們稱為試劑盒中樣本的凈化。在我們現(xiàn)有的試劑盒前處理方法中涉及到的zui常見的凈化是：液液分配法。
 比如：用復溶液溶解干燥殘留物之前先加入適量的正己烷，在加入正己烷和復溶液渦動后如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，可以60℃水浴加熱，至乳化現(xiàn)象消失或減弱后，加大離心轉速進行離心。
五、判定結果計算
對于新入行不久，對ELISA的結果分析這塊不太熟悉。客戶的實驗是通過人源的蛋白作為抗原，兔源多克隆抗體作為一抗（我們就是為了通過做ELISA來檢測其效價），然后通過辣根過氧化物作為二抗及顯色組分。實驗做完了，但不知道怎么分析結果，例如標準曲線怎么做之類的。另外，還想問一下，有沒有實用的軟件可用來分析。對于客戶的問題回答：

間接ELISA要是試劑盒，會有標準品的，把標準品按一定濃度梯度稀釋一塊兒做（一般有三個重復），zui后酶標儀或分光光度計比色，用軟件（oringe）繪制標準曲線，的出公式，按公式將樣品帶入公式，
用于ELISA結果計算zui方便的是logit曲線。曲線的橫坐標用標樣各濃度（ng/ml 或其他單位）的自然對數(shù)表示，縱坐標用各濃度顯色值的logit值表示。Logit值的計算方法如下：
                      B/B0         B
    Logit（B/B0）=ln———— =ln————
                     1-B/B0      B0-B
    其中B0是0ng/ml孔的顯色值，B是其它濃度的顯色值。

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